難度適中至偏難 整體具備高鑑別度
今年生物試題難易度，全國教師會（全教會）生物科教師群認為整體難度與去年相似。不過，全國高級中等學校教育產業工會（全中教）共同試題評論教師團隊則評估試題屬於「中間偏難」，但命題極具水準，能評量出學生的素養能力，整份試題具有高鑑別度。
在試卷各章節的配分上，全中教認為各冊比例分配大致平均，並特別重視演化生態學及科學史的入題；而全教會則觀察到，相較於選修生物一與四，選修生物二與三的出題比重相對較少。
重實驗操作與探究實作 成為搶分關鍵
今年的試題極度重視實驗操作與探究實作。全中教表示，實驗題十分重視學生的操作步驟、圖表判讀以及背景知識，而在閱讀題中，分子生物學的佔比偏高。全教會也特別指出，今年混合題型配分達30分，題型包含單選、多選、填充與圖示，整體設計恰當，如第42題測驗橫向運輸機制。
此外，探究實作題型亦是一大亮點，例如第32題藉由「密封生態球」情境，測驗考生對於操縱變因、設計對照組及生態系能量與物質循環的邏輯推論能力；第39題則要求考生繪製抗生素對細菌族群大小影響的圖表，藉此考驗學生的作圖能力並進行建模推測。
跨科結合與時事題 設計引發不同觀察
在時事與題型設計方面，兩會教師提出了不同的視角。全中教觀察到，今年試題文字敘述簡潔、題目靈活，但素養題與圖表題的比例較前兩年稍低，且「缺乏時事入題」。然而，全教會卻點出第11題結合了先前的時事新聞「邦克列酸」，以此來重新強調粒線體的功能。
除了時事，試題中也出現了創新的跨科題型，例如第10題考出「穩定同位素」，需要考生具備化學的對應知識；第12題的酵母菌題型則是課本實驗的延伸，結合了發酵作用及分子生物學技術。另外，全教會也發現第16題關於拉不拉多毛色基因調控的試題，與2002年國際生物奧林匹亞競賽國手選拔的題目題幹雷同，但在選項內容上有經過重新設計。
